今天和大家分享一篇来自Developmental and Comparative Immunology的文章：罗非鱼湖病毒（TiLV）感染期间斑马鱼幼体的I型干扰素依赖性反应，引用信息如下：

罗非鱼湖病毒是包膜病毒，单链RNA基因组，可以导致罗非鱼的高死亡率。在本研究中，我们证明了斑马鱼幼体在全身注射后易受TiLV感染，TiLV可以在斑马鱼幼体中复制，并导致其高死亡率（约70％）。组织病理学检查显示，TiLV感染导致斑马鱼幼体的病理异常，症状在大脑内清晰可见。此外，基因表达分析表明，TiLV感染可诱导与病毒dsRNA（rig-1（ddx58），tlr3，tlr22），转录因子（irf3，irf7），I型干扰素（infϕ1），抗病毒蛋白（mxa）和促炎细胞因子（il-1β）。我们还证明了重组斑马鱼IFNϕ1对TiLV感染期间斑马鱼幼体存活的保护作用。我们的结果表明斑马鱼幼体在TiLV感染过程中I型IFN应答的重要性，并证明斑马鱼是研究TiLV与鱼类宿主之间相互作用的良好模式生物。具体实验结果如下：

斑马鱼幼体在系统感染模型中易患TiLV

为了评估TiLV的致病性，将斑马鱼幼体（2.5 dpf）与TiLV或L15培养基一起注入居维叶或蛋黄管中，或通过浸泡感染。在感染后最多5天监测死亡率和发病率。与模拟感染的幼体显示出100％的存活率相比，实验感染TiLV的幼体在感染后第4天（55％）和感染后第5天（67％）处的死亡率增加了（图1A）。相反，通过对卵黄或浸泡感染TiLV并没有显着降低鱼的存活率（图1B和C）。用居维叶导管感染TiLV的斑马鱼幼体的死亡率与强病毒复制有关，在感染后1h至48h之间，病毒拷贝数增加了> 3.106倍（图1D）。此外，我们观察到实验感染的幼体表现出严重的疾病征兆，例如卵黄囊水肿，脊柱弯曲，眼和鱼鳔异常（图1E），并且随着鱼病的发展几乎没有或没有动力。

图1：在系统感染模型中，斑马鱼幼体对TiLV敏感

TiLV感染导致斑马鱼幼体的组织病理学异常

模拟感染组标本的组织学切片未显示细胞，组织或器官的任何异常或坏死迹象。在这些幼体中，感觉器官和大脑具有规则的神经细胞体成分和密集的神经纤维。食道和胃肠道具有典型的粘膜折叠，在其管腔中观察到消化的食物（图2，左图）。在TiLV感染的幼体中，主要在大脑内观察到病理异常，例如变性和坏死症状。在神经元细胞体之间可以看到变性区域，而神经纤维则松散堆积，在弯曲的轴突之间存在肺泡空间。肠上皮仅在后部区域稍微折叠（图2，右图）。

图2:TiLV诱导的斑马鱼幼体的组织病理学异常

TiLV感染诱导斑马鱼幼体参与I型IFN应答的基因表达上调

这些结果清楚地证明了斑马鱼幼体在TiLV感染过程中I型IFN免疫反应的激活。我们还研究了编码两种促炎细胞因子（il-1β和ifnγ1-2）的基因的表达谱。在感染了TiLV的幼体中，在48 h感染后时，il-1β表达明显上调，而在24 h感染后时则没有。在两个时间点，TiLV感染和模拟感染的幼体之间ifnγ1-2的表达没有显着差异（图3）。

图3：TiLV诱导的抗病毒反应基因表达的变化

重组zfIFNϕ1可降低TiLV感染的斑马鱼幼体死亡率，发病率和病毒载量

为了确定重组zfIFNγ1的抗病毒作用，在TiLV感染前6小时，系统性地向斑马鱼幼体（2 dpf）注射重组zfIFNγ1或PBS，并监测幼体的存活7天。与对照PBS预处理的幼体相比，重组zfIFNϕ1处理显着降低了被TiLV感染的幼体的死亡率（图4A）。用zfIFNϕ1免疫后患病幼体的数量也较少，感染症状通常不如PBS预处理的对照组严重（图4B）。另外，我们显示，在感染48h时，与用PBS预处理的幼体相比，此外，我们显示，在用zfIFNγ1预处理的斑马鱼幼体中，在感染48h后的病毒载量要比用γ1预处理的幼体低得多。

图4：重组zfIFNϕ1降低了TiLV感染的斑马鱼幼体的死亡率，发病率和病毒载量

重组zfIFNϕ1诱导斑马鱼幼体中mxa表达的上调

向斑马鱼幼体（2.5 dpf）系统注射重组zfIFNf1或PBS，并在注射后6 h和24 h分析mxa的表达。我们证明，在两个时间点，与对照组（注射PBS）相比，zfIFNγ1实验组的mxa表达均显着上调（图5A）。此外，在系统注射zfIFNϕ1或PBS的幼体中（TiLV感染前6小时）分析了TiLV感染期间mxa的表达。在两个时间点，与感染24h后的对照组相比，zfIFNγ1刺激组的mxa表达均有明显的上调。对照组在感染24h后和感染48h后mxa的表达没有显着差异，尽管在感染48h后观察到了表达的增加（图5B）。

图5：重组zfIFNϕ1诱导mxa基因表达的变化

总结：

我们证明了斑马鱼幼体易受体内注射TiLV感染，并且该病毒诱导了I型IFN途径以及促炎性细胞因子IL-1β中编码主要蛋白的基因表达上调。我们还发现重组斑马鱼IFNϕ1对TiLV感染期间斑马鱼幼体存活的保护作用。这些数据表明斑马鱼在TiLV感染过程中I型IFN反应的重要性，并证明斑马鱼是研究TiLV与鱼宿主之间相互作用的良好模式生物。