微生物制剂在虾苗标粗中对弧菌数量影响
更新时间：2022-10-14 11:32:29 来源/作者：海洋与渔业杂志/广州市欣海利生生物科技
一、材料与方法
1. 试验材料。（1）试验产品：本试验所使用的微生物制剂“苗康达”由广州市欣海利生生物科技有限公司生产，产品为由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和粪肠球菌组成，复合芽孢杆菌≥100×108cfu/g，粪肠球菌菌量≥50×108cfu/g。（2）主要试剂和仪器：TCBS培养基，营养琼脂，一次性培养皿，玻璃匀浆器，恒温培养箱，电子天平，移液枪。
2. 试验方法。福建漳浦县六鳌镇对虾标苗场，苗场气温30℃，选取3个金刚虾标苗池，同批次进苗标粗。设置对照池和实验池。实验池1：进苗前1天，使用“微生物制剂”15ppm打底；放苗后，每天使用5ppm“微生物制剂”，溶水后全池泼洒。实验池2：进苗前1天，使用“微生物制剂”15ppm打底；放苗后，每天使用10ppm“微生物制剂”，溶水后全池泼洒。对照池正常操作。
3. 检测方法。平板涂布法：虾苗幼体放入标苗池前1h取水体与进苗时取虾体检测最初弧菌和总菌数量。使用微生物制剂24h后取3个池水与虾研磨处理后，分别于TCBS培养皿和营养琼脂培养皿检测弧菌和总菌的含量。虾苗用滤网捞出，吸干水分用电子天平称取虾样0.1g，加入1mL无菌水，使用玻璃匀浆器研磨破碎制备虾样原液，将池水和研磨后的虾样原液按10倍梯度稀释，稀释4次至10-4，每个样品吸取100μL于培养皿上，均匀涂布，每个样品2个平行，于33℃培养箱培养16-18h，分别记录平板上弧菌数与总菌数。每天检测一次，连续6天，跟踪弧菌、总菌数量的变化。
二、结果和分析
1. 微生物制剂使用对弧菌的影响。实验开始时，实验组水体弧菌含量分别高达3.18×104cfu/mL、2.81×104cfu/mL，显著高于对照组1.20×104cfu/mL。随着使用“微生物制剂”后，两个实验组水体弧菌数量逐渐减少，长期低于6×103cfu/mL，后续实验过程中两个实验组水体弧菌数量明显比对照组低。实验最初，虾体弧菌基本相同，随着标粗时间延长，对照组虾体弧菌数量呈明显上升趋势，最高达5.22×105cfu/g；两个实验组虾体弧菌先上升，随着使用“微生物制剂”时间延长，虾体弧菌数量均呈下降趋势，最终分别低至2×103cfu/g和8×103cfu/g。
2. 微生物制剂使用对总菌的影响。实验开始时，三个组水体和虾体总菌浓度无明显差异。随着试验组使用“微生物制剂”，两个试验组水体和虾体总菌均呈现上升趋势，试验组水体总菌高达3.07×106cfu/mL显著高于对照组最高的1.7×106cfu/mL；试验组的虾体总菌高达1.31×108cfu/g显著高于对照组3.7×107cfu/g。整个实验过程两个实验组水体和虾体总菌含量均高对照组。
3. 分析。从以上结果可以看到，随着试验进行，由于芽孢杆菌抗逆性强，经活化后迅速形成营养体，产生大量抑菌物质能够有效抑制或杀灭水体中弧菌，实验池水体和虾体的弧菌不断下降，而对照池水体和虾体弧菌数量处于较高水平。芽孢杆菌活化后在虾体内定植，实验池中水体和虾体内总菌不断增加，芽孢杆菌与对虾养殖环境中的其他有害菌相互竞争，形成优势菌群。
三、讨论
使用有益菌提前预防抑制弧菌爆发，减少弧菌对虾苗的危害，是一条绿色可持续的发展道路。本研究采用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和粪肠球菌复合的微生物制剂产品，亦能显著抑制虾苗标粗池水体和虾体的弧菌浓度，提高总菌浓度。
本实验结果表明，微生物制剂应用于对虾标粗池，可显著抑制虾体和水体弧菌浓度，且使用10ppm微生物制剂的试验组虾体和水体弧菌含量更低，显著低于对照组，反映其能快速形成菌群优势，提高总菌浓度。
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